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TECHNICAL ARTICLES詳細介紹
來源與形態:該細胞系源自 BHK-21 母系細胞,經單細胞克隆技術篩選獲得純度更高的亞系(“C-13" 代表克隆編號)。體外培養時呈典型成纖維樣形態,貼壁生長,細胞呈長梭形或星形,排列疏松且邊界清晰,較原始 BHK-21 細胞形態更均一。在 37℃、5% CO?的培養條件下,增殖速度快,傳代周期約 1-2 天,可適應貼壁培養與懸浮培養,尤其適合無血清培養基馴化,能滿足規模化生產需求。
遺傳特征:保留 BHK-21 細胞的非整倍體核型(染色體數目約 44-46 條),核型穩定性優于母系細胞,基因組背景清晰且無內源性病毒序列。其成纖維細胞特性顯著,分泌膠原蛋白等細胞外基質成分的能力較強,同時對外源基因的轉染效率高,可通過抗性篩選快速獲得穩定表達株,長期傳代后仍能維持生物學特性的一致性。
病毒培養與疫苗生產
病毒學基礎研究
重組蛋白表達與生物制劑開發
優勢:遺傳均一性高,實驗重復性優于原始 BHK-21 細胞;病毒敏感性強,對多種病毒的增殖效率高且穩定;培養適應性好,可在貼壁與懸浮體系中高效增殖,便于規?;a;無內源性病毒污染,生物安全性高,被世界衛生組織(WHO)推薦為疫苗生產的合規細胞系。
局限性:對部分人類病毒(如肝炎病毒)的敏感性較低,應用范圍存在一定限制;懸浮培養時易形成細胞聚集體,需通過培養基優化減少聚集;長期傳代可能導致病毒敏感性下降,需定期凍存原始克隆株以維持特性。
培養條件:常規使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基,添加青mei素 - 鏈mei素抑制細菌污染。若用于疫苗生產,可改用無血清懸浮培養基,減少外源蛋白干擾,提升產物純度。培養過程中需控制細胞密度(貼壁培養融合度不超過 80%),避免過度密集導致細胞形態改變或增殖停滯。
污染防控:貼壁細胞易受支原體污染,需定期通過 PCR 或熒光染色檢測;凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液,液氮保存可長期維持活性,復蘇時 37℃水浴快速解凍,離心去除 DMSO 以降低細胞損傷。
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型號:BY-1296
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