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首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-1488SF9昆蟲卵巢細胞系

SF9昆蟲卵巢細胞系
產品型號:BY-1488
簡要描述:

SF9昆蟲卵巢細胞系為貼壁或懸浮生長的上皮樣細胞系,源自草地貪夜蛾,可高效表達重組蛋白,適用于桿狀病毒載體構建、蛋白功能及疫苗研發研究。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

SF9昆蟲卵巢細胞系
SF9昆蟲卵巢細胞系是從草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢組織分離建立的傳代細胞系,以高效表達重組蛋白的能力為核心特征。與 DogL1 狗肺細胞系的肺功能模擬特性不同,其核心價值在于作為桿狀病毒表達系統的宿主,實現重組蛋白的高水平可溶性表達,成為研究蛋白功能、疫苗研發及生物制藥的關鍵工具。該細胞系的重組蛋白表達量可達 300μg/mL(是哺乳動物細胞系的 5-10 倍),與 DogL1 細胞系形成 “蛋白表達 - 生理功能研究" 的功能互補體系,在分子生物學與生物技術領域具有重要意義。
一、細胞起源與生物學特性
  1. 來源與分離特征

SF9 細胞系源自 1983 年研究者對草地貪夜蛾蛹卵巢組織進行yi酶消化,通過有限稀釋法克隆獲得的細胞系(“SF" 代Spodoptera frugiperda,“9" 代表第 9 個克隆株)。該細胞系因桿狀病毒敏感性高且蛋白表達穩定(>95%),1985 年被確立為桿狀病毒表達系統的標準宿主,解決了早期昆蟲細胞培養中病毒復制效率低、蛋白表達量不足的問題,成為重組蛋白生產的標gan模型。
  1. 形態與生長特征

細胞呈圓形或橢圓形上皮樣形態,可同時適應貼壁與懸浮生長(貼壁時呈單層分布,懸浮時形成均一細胞團),與 DogL1 的立方狀肺泡上皮形態顯著不同,胞質內可見發達的內質網與高爾基體(占胞質體積的 35%,與蛋白分泌功能相關),細胞核呈圓形(核質比約 1:2.8,高于 DogL1 細胞)。在 27℃無 CO?條件下(昆蟲細胞te有培養環境),使用含 10% 胎牛血清的 Grace's 昆蟲培養基,倍增時間約 24-28 小時(遠短于 DogL1 細胞),懸浮培養密度可達 1×10?細胞 /mL(是貼壁培養的 5 倍),適合大規模懸浮發酵。連續傳代 200 次后仍保持病毒敏感性與蛋白表達能力(活性下降<5%),核型穩定(染色體數約 28-32 條,呈彌散型),無致瘤性,適合工業化生產應用。
  1. 功能特性

  • 桿狀病毒感染特性:對苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒(AcMNPV)等桿狀病毒的易感率達 100%,病毒復制周期約 72 小時(比哺乳動物細胞病毒復制快 30%);感染后 48 小時進入裂解期,釋放病毒粒子達 10? PFU/mL,同時啟動重組蛋白的高效表達(表達量隨病毒復制同步升高)。與 DogL1 細胞的天然病毒感染不同,其病毒受體為 gp64 蛋白(表達量是其他昆蟲細胞的 2.3 倍),確保病毒高效入侵。

  • 蛋白表達與修飾:具備完整的真核蛋白修飾系統,可實現糖基化、磷酸化等翻譯后修飾(糖基化效率達哺乳動物細胞的 70%),但糖鏈結構更簡單(以高甘露糖型為主);表達的重組蛋白可溶性率達 85%(高于大腸桿菌的 30%),且正確折疊率達 90%(通過圓二色譜驗證),尤其適合膜蛋白與復雜結構蛋白的表達(如 G 蛋白偶聯受體)。

  • 代謝適應性:在無血清培養基中可正常生長(細胞密度達 8×10?細胞 /mL),代謝葡萄糖的速率達 5.2mmol/10?細胞 / 天,乳酸積累量僅為哺乳動物細胞的 1/5,適合高密度發酵(最高密度可達 3×10?細胞 /mL);對氧氣濃度變化敏感,溶氧維持在 30-50% 時蛋白表達量最高(低于 20% 時下降 40%)。

二、核心應用領域
  1. 重組蛋白表達與功能研究

  • 膜蛋白表達優勢:利用 SF9 細胞成功表達多種難表達膜蛋白,如昆蟲氣味受體(表達量達 250μg/mL,是 HEK293 細胞的 8 倍),通過冷凍電鏡解析其與配體結合的三維結構(分辨率 3.2?);該受體在 SF9 細胞中形成功能性二聚體(通過 FRET 實驗驗證),而在大腸桿菌中僅以包涵體形式存在,體現其在復雜蛋白表達中的優勢(DogL1 細胞因表達量低,不適合此類研究)。

  • 蛋白相互作用分析:通過共表達技術在 SF9 細胞中構建病毒蛋白 - 宿主因子互作模型,發現桿狀病毒 IE1 蛋白與宿主細胞 Cyclin E 的結合(解離常數 1.8×10??M)可促進病毒 DNA 復制(復制效率提升 3.2 倍);免疫共沉淀結合質譜鑒定出 23 種互作蛋白,為病毒復制機制提供新見解。

  1. 病毒學研究與疫苗研發

  • 桿狀病毒載體改造:以 SF9 細胞為宿主,構建攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的重組桿狀病毒,通過熒光強度監測優化病毒載體(插入 CMV 啟動子后表達量提升 4.5 倍);該改造載體可高效轉導哺乳動物細胞(轉導效率達 70%),成為基因遞送的安全工具(無致病性)。

  • 亞單位疫苗生產:在 SF9 細胞中表達禽liu感病毒 HA 蛋白(表達量達 180μg/mL),經純化后免疫小鼠,中和抗體效價達 1:1280(保護率 90%);與 DogL1 細胞的病毒培養疫苗相比,亞單位疫苗安全性更高(無病毒復制風險),且生產周期縮短至 14 天(傳統方法需 28 天)。

  1. 生物制藥與工業化生產

  • 治療性蛋白生產:利用 SF9 細胞懸浮發酵生產人干擾素 -α,產量達 2.5g/L(是 CHO 細胞的 3 倍),且比活性達 1.8×10? IU/mg(與天然蛋白一致);該生產工藝通過 GMP 認證,生產成本降低 40%,已用于 veterinary 抗病du藥物研發。

  • 生物農藥開發:構建表達 Bt 毒蛋白的重組桿狀病毒,在 SF9 細胞中大量生產病毒制劑(病毒滴度達 101? PFU/mL),田間試驗顯示對小菜蛾防治效果達 95%(持效期 14 天),比化學農藥減少環境污染。

三、優勢與局限性
  • 優勢

  1. 蛋白表達量高:與 DogL1 細胞的生理功能導向不同,其重組蛋白表達量顯著高于哺乳動物細胞,尤其適合低豐度蛋白的規模化制備,降低研究與生產成本。

  1. 培養成本低:無需 CO?培養箱(27℃恒溫即可),可適應無血清懸浮培養,大規模發酵成本僅為 CHO 細胞的 1/3,適合工業化生產。

  1. 安全性優異:桿狀病毒對脊椎動物無致病性,表達產物無病毒污染風險,生物安全性高于動物源細胞系(如 DogL1)。

  • 局限性

  1. 蛋白修飾差異:糖基化等翻譯后修飾與哺乳動物存在差異(如缺乏唾液酸修飾),可能影響部分蛋白的體內活性(需體外修飾彌補)。

  1. 瞬時表達特性:重組蛋白表達依賴病毒感染(裂解性),無法建立穩定表達細胞系,連續生產需反復感染(DogL1 細胞可穩定表達)。

  1. 部分蛋白不適用:對含復雜二硫鍵的蛋白折疊效率低(如抗體片段),表達量僅為哺乳動物細胞的 1/2。

四、研究意義與展望
SF9 昆蟲卵巢細胞系的建立為重組蛋白表達提供了高效平臺,其與 DogL1 細胞系形成的 “蛋白生產 - 功能驗證" 研究體系,推動了從分子構建到生理功能的全鏈條研究。未來,通過基因編輯技術改造糖基轉移酶基因,可實現更接近哺乳動物的蛋白修飾;結合合成生物學構建 “細胞工廠",有望實現復雜天然產物的生物合成。作為生物技術領域的核心工具,其應用將持續推動疫苗研發、藥物生產與基礎研究的技術革新,為醫藥健康與農業生物技術提供關鍵支撐。

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