人細胞角蛋白17(CK17)ELISA
人細胞角蛋白17(CK17)ELISA 是一種用于檢測人體樣本中細胞角蛋白 17 含量的酶聯免疫吸附測定技術，在醫學研究和臨床診斷中具有重要意義。
細胞角蛋白 17 屬于中間絲蛋白家族，主要在復層上皮及一些惡性腫瘤細胞中表達。通過檢測其含量，可輔助疾病的診斷與病情評估。人 CK17 ELISA 試劑盒一般采用雙抗體夾心法原理。試劑盒中包含已包被抗人 CK17 抗體的微孔板，當加入待測樣本（如血清、血漿或細胞培養上清等）時，樣本中的 CK17 會與固相抗體特異性結合。之后加入酶標抗人 CK17 抗體，它會與已結合在固相抗體上的 CK17 結合，形成 “固相抗體 - CK17 - 酶標抗體" 免疫復合物。經過徹di洗滌，去除未結合的物質，此時加入酶底物顯色劑。在酶的催化作用下，底物發生顯色反應，顏色的深淺與樣本中 CK17 的含量成正比。最后，使用酶標儀在特定波長（通常為 450nm）下測定吸光度（OD 值），通過與預先繪制的標準曲線對比，就能準確計算出樣本中 CK17 的濃度。
以常見的試劑盒操作為例，首先需準備好樣本，按照規定進行采集與預處理，保證樣本的質量。同時，將試劑盒從冷藏環境取出，平衡至室溫。在微孔板中準確加入標準品，設置不同濃度梯度，如 0、10、20、40、80、160 pg/mL 等，用于繪制標準曲線。接著，將處理好的待測樣本加入對應的孔中。加入樣本后，輕輕振蕩混勻，用封板膜封板，置于 37℃恒溫培養箱中孵育一段時間，常見為 30 分鐘。孵育結束后，棄去孔內液體，用洗滌緩沖液洗滌微孔板數次，每次浸泡一定時間（如 30 秒），確保徹di去除未結合物質，然后拍干。隨后加入酶標工作液，再次孵育并洗滌。之后依次加入顯色劑 A 和顯色劑 B，輕輕振蕩混勻，在 37℃避光環境下顯色，顯色時間一般為 15 分鐘左右。當顯色達到預期效果后，加入終止液終止反應，此時溶液顏色由藍色變為黃色。在加入終止液后的 15 分鐘內，使用酶標儀測定各孔的 OD 值。
人 CK17 ELISA 檢測具有靈敏度高、特異性強、重復性好等優點，能夠準確檢測出低含量的 CK17，為疾病的早期診斷提供依據。在臨床應用方面，可用于某些上皮源性腫瘤（如乳腺癌、肺癌等）的輔助診斷、病情監測以及預后評估，幫助醫生更好地制定治療方案和判斷患者的康復情況。
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