CAM-M白腹錦雞肌肉細(xì)胞系
CAM-M白腹錦雞肌肉細(xì)胞系作為針對白腹錦雞肌肉組織的特異性細(xì)胞模型，在珍xi禽類肌肉發(fā)育機(jī)制、肌纖維功能調(diào)控及相關(guān)疾病研究領(lǐng)域具有重要價值。它的建立為深入探究白腹錦雞肌肉細(xì)胞的分化規(guī)律、肌肉收縮機(jī)制以及肌肉相關(guān)疾病的發(fā)生路徑等提供了穩(wěn)定的體外研究平臺，對這一珍xi禽類的保護(hù)和肌肉生物學(xué)研究意義重大。
白腹錦雞作為國家二級保護(hù)動物，其du特的外形和生態(tài)價值備受關(guān)注，而肌肉系統(tǒng)是其運動、生存的重要支撐。肌肉的正常發(fā)育涉及肌細(xì)胞的增殖、分化、肌纖維形成以及肌肉組織的構(gòu)建，任何環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常都可能影響其運動能力和生存狀態(tài)。由于白腹錦雞野生種群數(shù)量有限，且受保護(hù)法規(guī)限制，對其肌肉的深入研究存在諸多不便，傳統(tǒng)的研究方法難以滿足需求。因此，建立 CAM-M 白腹錦雞肌肉細(xì)胞系，成為解析其肌肉發(fā)育奧秘、開展物種保護(hù)研究的重要突破口。
CAM-M 白腹錦雞肌肉細(xì)胞系的建立經(jīng)過了嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范的操作流程。選取人工繁育的健康白腹錦雞雛鳥的腿部肌肉組織（非損傷性取樣），在超凈工作臺中去除肌肉表面的筋膜和結(jié)締組織。將肌肉組zhi剪切成 1mm3 左右的小塊，用含雙抗的磷酸鹽緩沖液反復(fù)沖洗，以清除血液和雜質(zhì)。加入細(xì)胞分散液，在 37℃條件下處理 20-25 分鐘，期間每隔 5 分鐘輕輕吹打一次使細(xì)胞分散。收集細(xì)胞懸液，經(jīng) 70μm 細(xì)胞濾網(wǎng)過濾后，1000r/min 離心 5 分鐘，棄上清，用含 15% 胎牛血清的 DMEM 高糖培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，接種于膠原蛋白包被的培養(yǎng)瓶中，置于 37℃、5% CO?恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行原代培養(yǎng)。培養(yǎng)初期，每 24 小時更換一次培養(yǎng)液，待細(xì)胞匯合度達(dá) 80% 時進(jìn)行傳代，目前該細(xì)胞系已穩(wěn)定傳代至 40 代以上，細(xì)胞活力保持在 85% 以上。
該細(xì)胞系呈現(xiàn)典型的肌纖維樣形態(tài)，細(xì)胞呈長梭形，排列具有一定的方向性，部分細(xì)胞可相互融合形成多核肌管，胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核呈橢圓形，具有較強(qiáng)的貼壁生長能力。生長特性研究顯示，CAM-M 細(xì)胞在 DMEM 高糖培養(yǎng)液中生長狀態(tài)最佳，相較于其他培養(yǎng)液，細(xì)胞增殖速度提高約 20%；最適培養(yǎng)溫度為 37℃，與白腹錦雞的體溫相符；當(dāng)胎牛血清濃度為 15% 時，細(xì)胞群體倍增時間最短，約為 56 小時。傳代至 30 代后，細(xì)胞形態(tài)和增殖速率無明顯變化，核型分析表明其染色體數(shù)目穩(wěn)定，遺傳背景可靠，仍保留肌肉細(xì)胞的特性。
在功能特性方面，CAM-M 白腹錦雞肌肉細(xì)胞系展現(xiàn)出豐富的肌肉細(xì)胞功能。免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞高表達(dá)肌肉細(xì)胞特異性標(biāo)志物如肌動蛋白（Actin）、肌球蛋白（Myosin），證實其肌肉細(xì)胞屬性。該細(xì)胞系具有一定的收縮能力，在體外培養(yǎng)條件下，經(jīng)適當(dāng)誘導(dǎo)后可觀察到細(xì)胞的收縮現(xiàn)象，這對研究肌肉的收縮機(jī)制具有重要意義。同時，CAM-M 細(xì)胞在受到機(jī)械刺激或營養(yǎng)變化等因素影響時，會表現(xiàn)出肌肉細(xì)胞te有的應(yīng)激反應(yīng)，如能量代謝水平改變、相關(guān)酶活性變化等，為研究肌肉的適應(yīng)機(jī)制提供了理想模型。此外，該細(xì)胞系對一些可能影響肌肉功能的病原體表現(xiàn)出一定的敏感性，感染后會影響細(xì)胞的正常生長和功能，為研究病原體與肌肉細(xì)胞的相互作用提供了良好材料。
CAM-M 白腹錦雞肌肉細(xì)胞系在多個研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在肌肉發(fā)育研究中，通過對該細(xì)胞系進(jìn)行相關(guān)實驗，揭示了 MyoD 家族基因在肌肉細(xì)胞分化中的關(guān)鍵調(diào)控作用；在物種保護(hù)方面，利用該細(xì)胞系開展了肌肉細(xì)胞的低溫保存研究，為白腹錦雞的種質(zhì)資源保護(hù)提供了新的思路；在比較生物學(xué)研究中，通過與其他禽類肌肉細(xì)胞系的對比分析，探討了白腹錦雞肌肉系統(tǒng)的獨te性。
作為穩(wěn)定可靠的白腹錦雞肌肉細(xì)胞模型，CAM-M 不僅填bu了白腹錦雞肌肉細(xì)胞體外研究的空白，更為珍xi禽類肌肉生物學(xué)及物種保護(hù)研究提供了重要工具，推動了白腹錦雞保護(hù)技術(shù)的發(fā)展，對維護(hù)生物多樣性具有重要意義。
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