A875人黑色素瘤細胞系
A875人黑色素瘤細胞系自建立以來，成為黑色素瘤基礎研究與藥物開發的重要模型。該細胞系源于人體黑色素瘤組織，因其du特的生物學特性，為揭示黑色素瘤惡性進展機制、評估抗癌藥物療效提供了關鍵研究對象。
在細胞生物學特性上，A875 細胞呈梭形或不規則多邊形，具有典型的上皮 - 間質轉化（EMT）特征，細胞極性喪失，間質標志物波形蛋白（Vimentin）呈強陽性表達。其高表達黑色素瘤相關抗原（MAGE）和小眼畸形相關轉錄因子（MITF），MITF 表達水平約為正常黑素細胞的 8 倍，驅動細胞內黑色素合成通路。A875 細胞還過表達絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路中的關鍵蛋白，BRAF V600E 突變率高達 90%，該突變使 BRAF 蛋白持續激活，下游 MEK 和 ERK 磷酸化水平提升 200%，推動細胞異常增殖。實驗數據顯示，A875 細胞的倍增時間僅為 24 小時，在軟瓊脂克隆形成實驗中，單個細胞可形成平均直徑 1.2mm 的克隆，克隆形成率達 45% 。在侵襲轉移能力方面，Transwell 實驗中，A875 細胞穿過 Matrigel 基質膠的數量是正常黑素細胞的 12 倍；劃痕愈合實驗表明，其傷口閉合速度達 72μm/h。動物實驗證實，皮下接種 5×10?個 A875 細胞，10 - 14 天即可形成直徑超 8mm 的實體瘤，且易發生肺轉移，肺部轉移灶檢出率高達 75%。
A875 細胞的培養需要精準把控條件。常用含 10% 胎牛血清（FBS）、1% 雙抗（青mei素 - 鏈mei素）的 RPMI 1640 培養基，FBS 提供的胰島素和轉鐵蛋白可協同支持細胞生長。培養環境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫培養箱中，當細胞融合度達到 80% - 90% 時，按 1:3 - 1:4 比例傳代，使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化細胞，傳代周期約 3 天。新接種細胞 2 - 4 小時開始貼壁，12 小時內基本完成貼壁過程。培養過程中，需每日在顯微鏡下觀察細胞形態，每 2 - 3 天更換一次培養液，嚴格執行無菌操作，防止真菌、支原體污染，一旦污染，細胞生長速度將下降 60% 以上，形態出現明顯異常。
在黑色素瘤研究領域，A875 細胞系成果豐碩。在機制研究方面，研究人員利用該細胞系發現，微小 RNA - 211（miR - 211）通過靶向調控凋亡相關蛋白 Bim，抑制細胞凋亡，促進 A875 細胞存活；長鏈非編碼 RNA LncRNA - MALAT1 可通過與 EZH2 結合，上調 SOX2 表達，增強細胞的干性和侵襲能力。在藥物研發層面，A875 細胞系是評估 BRAF 抑制劑、MEK 抑制劑等靶向藥物的核心模型。例如，維莫非尼（Vemurafenib）在 A875 細胞中的 IC??值為 0.3μM，可顯著抑制細胞增殖，誘導 30% 的細胞發生凋亡；聯合使用 MEK 抑制劑曲美替尼（Trametinib），能使細胞凋亡率提升至 55%。在免yi治療研究中，基于 A875 細胞構建的腫瘤模型，成功驗證了 PD - 1 抑制劑聯合 CTLA - 4 抑制劑的協同抗腫瘤效果，腫瘤體積縮小率達 60%。不過，使用 A875 細胞系時需注意，長期傳代可能導致基因突變積累，實驗前需通過短串聯重復序列（STR）分析、BRAF 基因突變檢測等手段進行嚴格鑒定，確保細胞系的遺傳穩定性和實驗數據可靠性。
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