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首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-1329CHO-K1-S2-HSA中國倉鼠卵巢細胞系

CHO-K1-S2-HSA中國倉鼠卵巢細胞系
產品型號:BY-1329
簡要描述:

CHO-K1-S2-HSA中國倉鼠卵巢細胞系,上皮樣,貼壁生長,穩定表達 S2-HSA 融合蛋白,適用于該蛋白功能研究、相關通路分析及生物制藥領域的應用。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

CHO-K1-S2-HSA中國倉鼠卵巢細胞系
CHO-K1-S2-HSA中國倉鼠卵巢細胞系是經基因工程改造的 CHO-K1 衍生株,通過導入 S2-HSA 融合基因構建而成,能穩定表達 S2-HSA 融合蛋白,因表達效率高、功能特異性強,成為重組蛋白研究與生物制藥的重要模型。其保留了 CHO-K1 細胞遺傳穩定、易培養的優勢,同時賦予了靶向生產 S2-HSA 融合蛋白的能力,為該蛋白的功能解析及相關應用開發提供了精準工具。
一、細胞構建與基本特性
  • 來源與構建:該細胞系源自 CHO-K1 細胞(CHO 細胞的經典亞株),通過載體介導(如含 EF1α 啟動子的表達質粒)將 S2-HSA 融合基因導入細胞,經嘌呤霉素抗性篩選及單克隆純化獲得穩定株。“S2-HSA" 代表其表達的融合蛋白(S2 片段與人類血清白蛋白的融合產物),明確標識其功能特性,確保蛋白表達的均一性與持續性。

  • 形態與增殖:體外培養呈典型上皮樣形態,貼壁生長,細胞呈多邊形,排列緊密,形態與親本 CHO-K1 細胞一致。在 37℃、5% CO?條件下,增殖穩定,傳代周期約 24-30 小時,可適應含 10% 胎牛血清的 F12K 培養基,兼容無血清培養體系,傳代 50 次以上仍能維持穩定形態與活性,貼壁能力強,為大規模培養提供便利。

  • 表達特征:S2-HSA 融合蛋白主要分泌至細胞外培養基中,表達量可達 10-15μg/10?細胞 / 24 小時(通過 ELISA 檢測),長期傳代(>40 代)后表達量波動<10%。該融合蛋白保留 S2 片段的生物學活性與 HSA 的半衰期延長特性,能與特異性抗體結合,且翻譯后修飾(如糖基化)與天然蛋白一致,為功能研究與應用開發奠定基礎。

二、核心應用領域
  1. 重組融合蛋白功能研究

該細胞系是解析 S2-HSA 融合蛋白功能的理想模型。通過純化培養基中的融合蛋白,可研究其與靶分子的相互作用(如表面等離子體共振實驗),明確 S2 片段的生物學活性及 HSA 的增效作用。例如,在研究 S2 片段的抗病毒機制時,其能穩定提供高純度融合蛋白,通過病毒中和實驗驗證其抑制活性,為功能機制提供量化數據。
  1. 生物制藥與蛋白生產

在生物制藥領域,該細胞系因高效表達 S2-HSA 融合蛋白,成為該蛋白工業化生產的優選細胞基質。S2-HSA 融合蛋白兼具 S2 片段的功能活性與 HSA 的長半衰期,在抗病毒、抗炎等領域有潛在應用價值。其可通過懸浮培養技術放大至生物反應器,蛋白產量比常規 CHO-K1 細胞高 3-5 倍,且產物純度達 95% 以上,顯著降低下游純化成本,為候選藥物的臨床前研究提供充足原料。
  1. 蛋白表達系統優化研究

該細胞系可用于重組蛋白表達系統的優化探索。通過分析 S2-HSA 融合基因的整合位點、啟動子活性及 mRNA 穩定性,可篩選更高效的表達元件;或通過基因編輯技術(如 CRISPR/Cas9)優化細胞代謝通路,進一步提升蛋白產量。例如,敲除細胞內蛋白酶相關基因后,融合蛋白降解率降低 20%,為提高重組蛋白表達效率提供新策略。
三、優勢與局限性
  • 優勢:S2-HSA 融合蛋白表達穩定,分泌效率高,便于純化;遺傳背景清晰,與 CHO-K1 細胞同源性高,實驗重復性好;兼容貼壁與懸浮培養,可規模化生產,滿足工業化需求;蛋白翻譯后修飾接近天然狀態,生物活性保留完整,適合臨床前研究。

  • 局限性:長期培養需維持抗性篩選壓力,增加培養成本;融合蛋白的糖基化模式與人類細胞存在細微差異,可能影響部分功能研究的外推性;對培養基中血清成分敏感,無血清適應需 6-8 周的馴化周期。

四、培養與實驗注意事項
  • 培養條件:基礎培養基為含 10% 胎牛血清的 F12K 培養基,添加嘌呤霉素(2μg/mL)維持抗性篩選,同時加入谷an酰胺與非必需氨基酸促進增殖。傳代時控制融合度在 60%-70%,用 EDTA - yi酶溫和消化,避免過度處理影響細胞活性。懸浮培養可采用無血清培養基,逐步降低血清濃度至 0.5%,最終細胞密度可達 3×10?個 /mL。

  • 蛋白純化與檢測:收集培養上清后,通過 Protein A 親和層析純化 S2-HSA 融合蛋白,純度可達 95% 以上;通過 Western blot 驗證蛋白分子量,ELISA 檢測濃度,確保蛋白質量。凍存時使用含 10% DMSO 的wan全培養基,液氮保存,復蘇后傳代 2 次待狀態穩定后再用于實驗,保證結果可靠性。

五、研究意義
CHO-K1-S2-HSA 細胞系的建立為 S2-HSA 融合蛋白的研究與應用提供了標準化工具,推動了重組融合蛋白在生物制藥領域的開發進程。在基礎研究中,其助力闡明了融合蛋白的表達調控機制,為優化重組蛋白生產系統提供了線索;在應用領域,其為 S2-HSA 融合蛋白的臨床前研究提供了充足原料,加速了相關候選藥物的研發周期。隨著細胞培養技術與基因編輯手段的結合,該細胞系有望在精準蛋白生產與個性化醫療研究中發揮更大作用。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。

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