9L/lacZ大鼠膠質肉瘤細胞系
9L/lacZ大鼠膠質肉瘤細胞系作為穩定表達 lacZ 基因的大鼠腦腫瘤細胞模型，因兼具膠質肉瘤的惡性生物學特性與可追蹤的報告基因功能，在腦腫瘤侵襲機制、基因治療及藥物遞送研究中具有du特jia值，成為探究中樞神經系統惡性腫瘤的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自 9L 大鼠膠質肉瘤細胞經 lacZ 基因穩定轉染構建，通過 G418 篩選獲得單克隆細胞株。細胞形態呈多形性，主要為梭形和星形，胞體直徑約 15-30μm，胞質豐富，可見嗜酸性顆粒，約 12% 細胞呈現多核現象，細胞核大而畸形，核質比顯著增高，核仁明顯。生長方式為貼壁生長，部分細胞呈懸浮狀態，無接觸抑制，傳代后 24 小時貼壁率達 88%。核心參數表現出重組細胞特征：倍增時間約 30 小時，連續傳代 50 次后染色體核型不穩定（染色體數約 54-58 條）；膠質細胞標志物膠質纖維酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（Vimentin）免疫熒光陽性率分別為 91% 和 96%，lacZ 基因表達穩定，X-gal 染色陽性率達 98%；具有ji強的侵襲能力，Transwell 實驗中穿膜細胞數是正常膠質細胞的 5.3 倍；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在腦腫瘤侵襲機制研究中，9L/lacZ 細胞經表皮生長因子（EGF）刺激后，基質金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）活性增加 4.8 倍，侵襲能力提升 3.6 倍，結合 lacZ 基因的可視化追蹤，可清晰觀察到細胞在腦切片中的遷移路徑，為解析膠質肉瘤的腦內侵襲模式提供理想模型。
基因治療研究方面，該細胞作為報告基因模型，在腺相關病毒（AAV）介導的基因遞送實驗中，lacZ 表達量增加 6.2 倍，轉染效率達 75%，可直觀評估基因治療載體的靶向性和效率。在藥物篩選領域，該細胞對替mo唑胺處理敏感，24 小時后細胞活力下降 45%，β- 半乳糖苷酶活性與細胞存活狀態呈線性相關，可通過比色法快速評估藥物療效，篩選效率提升 40%。
此外，將該細胞立體定向接種于大鼠腦內，7 天后形成可通過 X-gal 染色定位的腫瘤灶，21 天后腫瘤體積達 0.8cm3，成瘤率 100%，且腫瘤侵襲范圍與 lacZ 陽性區域高度一致，為體內評估抗腫瘤藥物的穿透性和靶向性提供可靠模型。
培養與保存規范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培養基，添加 400μg/ml G418、2mM 谷an酰胺及 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 1-2 天更換一次，維持 G418 選擇壓力以確保 lacZ 基因穩定表達。傳代時，采用細胞刮除法收集貼壁細胞，輕柔吹打制成單細胞懸液，傳代比例 1:4-1:6，每 2-3 天傳代一次，避免細胞聚團影響活性。
凍存液配方為培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，細胞濃度調整為 8×10?個 /ml，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇存活率達 90% 以上，2 代內可恢復 lacZ 基因的穩定表達。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需立即更換含 G418 的新鮮培養基，靜置培養 24 小時后觀察細胞狀態，X-gal 染色驗證 lacZ 表達正常后方可進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作需符合生物安全二級防護要求。
9L/lacZ 大鼠膠質肉瘤細胞系以其穩定的報告基因表達、典型的膠質肉瘤惡性表型及高效的可追蹤特性，在腦腫瘤研究與基因治療開發中發揮著重要作用，為揭示腦腫瘤的侵襲機制和評估新型治療策略提供了可靠的可視化研究平臺。
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