日本精品中文字幕在线-无码日韩人妻蜜臀AV色欲工具-中文字字幕在线精品乱码-双乳奶水饱满少妇呻吟免费看

產(chǎn)品系統(tǒng)PRODUCT CENTER

在發(fā)展中求生存,不斷完善,以良好信譽和科學(xué)的管理促進(jìn)企業(yè)迅速發(fā)展
產(chǎn)品系統(tǒng)

首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-1398Vero/Slam/V非洲綠猴腎細(xì)胞系

Vero/Slam/V非洲綠猴腎細(xì)胞系
產(chǎn)品型號:BY-1398
簡要描述:

Vero/Slam/V非洲綠猴腎細(xì)胞系,Vero/Slam/V 為表達(dá) Slam 受體的非洲綠猴腎細(xì)胞系,上皮樣,貼壁生長,對麻疹病毒等敏感,支持高效復(fù)制,適用于病毒研究及疫苗研發(fā)。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質(zhì)量保障

    Quality Assurance

詳細(xì)介紹

Vero/Slam/V非洲綠猴腎細(xì)胞系
Vero/Slam/V非洲綠猴腎細(xì)胞系,Vero/Slam/V 細(xì)胞系是在非洲綠猴腎 Vero 細(xì)胞基礎(chǔ)上,通過基因工程技術(shù)穩(wěn)定表達(dá)人源信號淋巴細(xì)胞活化分子(Slam,即 CD150)構(gòu)建的改造細(xì)胞模型。其保留 Vero 細(xì)胞的增殖穩(wěn)定性與生物安全性,同時因 Slam 受體的高表達(dá),顯著增強對麻疹病毒等副黏病毒的敏感性,成為該類病毒研究、疫苗研發(fā)及抗病du藥物篩選的關(guān)鍵工具。
一、細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來源與改造機制

Vero 細(xì)胞源自 1962 年分離的非洲綠猴腎細(xì)胞,而 Vero/Slam/V 通過慢病毒載體介導(dǎo),將人 Slam 基因整合至 Vero 細(xì)胞基因組獲得(“Slam/V" 代表 Slam 表達(dá)載體與 Vero 細(xì)胞的融合標(biāo)記)。Slam 是麻疹病毒的主要細(xì)胞受體,其胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域可特異性結(jié)合病毒血凝素蛋白(H 蛋白),使改造后的細(xì)胞對麻疹病毒的感染效率較親本 Vero 細(xì)胞提升 10-15 倍。
  1. 形態(tài)與生長特征

細(xì)胞呈典型上皮樣形態(tài),貼壁生長時呈多邊形,排列緊密如鋪路石狀,胞質(zhì)豐富,核仁清晰。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,倍增時間約 40-48 小時,傳代比例 1:3 至 1:5,每周換液 2-3 次以維持細(xì)胞融合度在 70%-80%。細(xì)胞凍存復(fù)蘇存活率超 90%,連續(xù)傳代 60 次后 Slam 表達(dá)量無顯著下降(流式細(xì)胞術(shù)檢測陽性率>95%),遺傳穩(wěn)定性符合 WHO 生物制品用細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)。
  1. 功能特性

  • Slam 表達(dá)與定位:Slam 主要定位于細(xì)胞膜表面,表達(dá)量達(dá) 1.2×10?分子 / 細(xì)胞(流式細(xì)胞術(shù)定量),較親本細(xì)胞高 20 倍以上,且呈均一性表達(dá)(變異系數(shù)<8%),為病毒感染提供均一的受體環(huán)境。

  • 病毒敏感性:對麻疹病毒的感染效率達(dá) 98%(免疫熒光檢測核蛋白 NP),感染后 48 小時病毒滴度達(dá) 10?-10? PFU/mL,較 Vero 細(xì)胞高 2-3 個數(shù)量級;對犬瘟熱病毒、小反芻獸疫病毒等其他副黏病毒也具有廣譜敏感性,滴度提升 1-2 個數(shù)量級。

  • 生物安全性:無致瘤性(裸鼠接種實驗陰性),外源病毒與支原體檢測均為陰性,符合人用疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)要求。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 麻疹病毒研究與疫苗生產(chǎn)

  • 病毒分離與分型:作為麻疹病毒分離的 “金標(biāo)準(zhǔn)" 改造細(xì)胞系,臨床樣本接種后分離效率達(dá) 96%,較傳統(tǒng) Vero 細(xì)胞高 40%,可通過蝕斑形態(tài)差異區(qū)分疫苗株與野毒株(疫苗株蝕斑較小且邊緣規(guī)則)。其分離的病毒株經(jīng)全基因組測序驗證,遺傳一致性達(dá) 99.5%,為麻疹病毒基因型監(jiān)測提供標(biāo)準(zhǔn)化毒株。

  • 減毒活疫苗生產(chǎn):因病毒產(chǎn)量高且安全性可靠,已用于麻疹減毒活疫苗的工業(yè)化生產(chǎn)。在微載體培養(yǎng)系統(tǒng)中,麻疹病毒滴度達(dá) 5×10? PFU/mL,單批次 500L 反應(yīng)器可生產(chǎn) 500 萬劑疫苗,批間差異<5%,疫苗中殘留宿主細(xì)胞 DNA<10pg / 劑,符合 WHO 規(guī)定的生物制品標(biāo)準(zhǔn)。

  1. 其他副黏病毒研究與診斷

  • 跨物種病毒研究:對犬瘟熱病毒(CDV)的敏感性顯著提升,感染后可觀察到典型細(xì)胞病變(多核合胞體形成),為 CDV 的跨物種傳播機制研究提供模型。例如,通過比較不同動物源 Slam 受體在該細(xì)胞中的表達(dá)差異,揭示了 CDV 從犬向熊貓傳播的受體適應(yīng)性突變。

  • 快速診斷應(yīng)用:可用于副黏病毒感染的病原學(xué)診斷,將臨床樣本接種后 48 小時內(nèi)通過免疫熒光檢測病毒抗原,診斷符合率達(dá) 92%,較傳統(tǒng) RT-PCR 方法縮短檢測時間 24 小時,為疫情快速響應(yīng)提供技術(shù)支持。

  1. 抗病du藥物篩選與機制研究

  • 藥物活性評估:基于其高病毒產(chǎn)量,可構(gòu)建高通量藥物篩選模型。例如,通過檢測融合抑制劑對麻疹病毒包膜與細(xì)胞膜融合的阻斷效果,測定其 EC??=0.8μM,與動物實驗結(jié)果一致性達(dá) 0.93,為抗麻疹病du藥物研發(fā)提供可靠數(shù)據(jù)。

  • 病毒入侵機制解析:利用該細(xì)胞系研究麻疹病毒與 Slam 的相互作用,已鑒定出 Slam 的 D1 結(jié)構(gòu)域是病毒結(jié)合的關(guān)鍵位點,為靶向受體的抗病du藥物設(shè)計提供分子靶點。

三、培養(yǎng)與實驗操作要點
  1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)方案

  • 培養(yǎng)基:DMEM 高糖培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清,pH 維持在 7.2-7.4,可加入非必需氨基酸提升細(xì)胞活力。

  • 傳代流程:當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80%-90% 時,棄舊培養(yǎng)基,PBS 洗滌 2 次,加入細(xì)胞解離液,37℃孵育 3-5 分鐘至細(xì)胞脫落,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,按 1:4 比例接種至新培養(yǎng)瓶,避免過度融合導(dǎo)致 Slam 表達(dá)下調(diào)。

  • 凍存保護(hù):取對數(shù)生長期細(xì)胞,用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基重懸至密度 1×10?個 /mL,程序降溫后液氮保存,復(fù)蘇后傳代 2 次再用于病毒實驗(確保受體表達(dá)穩(wěn)定)。

  1. 病毒培養(yǎng)與檢測

  • 麻疹病毒接種:細(xì)胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板,培養(yǎng) 24 小時至融合度 70%,用無血清培養(yǎng)基稀釋病毒(MOI=0.01),37℃吸附 1 小時,換含 2% 血清的維持液,72 小時后通過蝕斑實驗測定病毒滴度,或通過免疫熒光檢測 NP 蛋白評估感染效率。

  • 藥物篩選操作:感染前 1 小時加入待篩藥物,感染后繼續(xù)培養(yǎng) 48 小時,通過 CCK-8 檢測細(xì)胞活力(排除毒性),同時檢測病毒產(chǎn)量,計算藥物抑制率與選擇指數(shù)(SI=CC??/EC??)。

四、優(yōu)勢與局限性
  • 優(yōu)勢

  1. 病毒敏感性突出:對麻疹病毒等副黏病毒的感染效率與產(chǎn)量顯著優(yōu)于親本 Vero 細(xì)胞,縮短實驗周期并提升數(shù)據(jù)可靠性。

  1. 生物安全性高:保留 Vero 細(xì)胞的無致瘤性特征,符合疫苗生產(chǎn)的嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)用轉(zhuǎn)化潛力大。

  1. 操作簡便:貼壁生長穩(wěn)定,傳代與凍存流程成熟,適合標(biāo)準(zhǔn)化實驗室與工業(yè)化生產(chǎn)。

  • 局限性

  1. 受體依賴性:僅對依賴 Slam 的病毒有效,對其他受體介導(dǎo)的病毒(如脊髓灰質(zhì)炎病毒)敏感性無提升,應(yīng)用范圍受限。

  1. 血清依賴度:在無血清培養(yǎng)基中 Slam 表達(dá)量下降約 30%,病毒產(chǎn)量降低,增加工業(yè)化生產(chǎn)成本。

  1. 傳代限制:傳代>80 次后病毒敏感性下降約 25%,需定期復(fù)蘇早期凍存細(xì)胞。

五、研究意義與展望
Vero/Slam/V 細(xì)胞系的構(gòu)建為副黏病毒研究提供了高效工具,其在麻疹病毒疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用,使疫苗產(chǎn)量提升 30%,推動了*麻疹消除計劃(WHO 目標(biāo) 2030 年消除麻疹)的實施。在基礎(chǔ)研究中,其揭示了 Slam 受體在病毒入侵中的關(guān)鍵作用,為其他病毒受體研究提供了范式。未來,通過同時表達(dá)多種病毒受體(如 Slam 與 Nectin-4),有望構(gòu)建廣譜病毒敏感細(xì)胞系;結(jié)合 3D 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),可模擬體內(nèi)組織微環(huán)境,進(jìn)一步提升病毒研究的真實性與疫苗開發(fā)的效率。

以上信息僅供參考,詳細(xì)信息請聯(lián)系我們。


產(chǎn)品咨詢

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7

相關(guān)產(chǎn)品

掃一掃
添加微信

掃一掃
手機瀏覽

Copyright©2025  上海乾思生物科技有限公司  版權(quán)所有    備案號:滬ICP備2023041625號-7    sitemap.xml    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸

TEL:021-34556080